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專注于 外泌體與非編碼RNA試劑研發(fā) 技術服務與臨床轉化
外泌體膜染料:PKH67、PKH26
PKH67(綠色熒光)或PKH26(紅色熒光)外泌體染色試劑盒,采用專利外泌體膜標記技術可以穩(wěn)定的與外泌體膜結構結合并發(fā)出綠色/紅色熒光,細胞毒性較小,熒光背景低,脂溶性高。主要用于外泌體的體外和體內(in vivo)示蹤,也可用于細胞膜染色。

產品效果

PKH26激發(fā)光與發(fā)射光圖譜

PKH67激發(fā)光與發(fā)射光圖譜


PKH26染色后外泌體與細胞共培

PKH67染色后外泌體與細胞共培

產品組成

方法一:外泌體直接染色

1. 適量(10ug,BCA法測量)外泌體溶于500ul Diluent C中(可以用DPBS代替);

2. 適量的PKH26(10ug外泌體推薦用量不超過1ul)染料溶于等體積的Diluent C中(可以用DPBS代替),溫和吹打混勻;

3. 將步驟2中的溶液加入1中并迅速吹打混勻。

4. 避光,室溫靜置孵育5-10 min;

5. 加入等體積(2ml)的血清(exosome free),或者1%BSA終止染色反應;

6. 使用超濾/超離方式洗凈未與外泌體結合的PKH26染料。


方法二:通過細胞染色間接對外泌體染色

1. 2×107細胞500g,5min離心,盡量棄去上清。

2. 加入1ml Diluent C,溫和吹打混勻。

3. 將4ul PKH26儲存液加入1ml Diluent C中(可以用DPBS代替),溫和吹打混勻;

4. 將步驟2中制備的細胞懸液加入步驟3中的制備的PKH26工作液,快速吹打混勻后室溫靜置孵育5min;

5. 加入等體積(2ml)的血清(exosome free),或者1%BSA終止染色反應;

6. 使用超濾/超離方式洗凈未與外泌體結合的PKH26染料。


注意:染色后的外泌體請立即使用或儲存于-80℃


參考文獻

Verweij et al. The power of imaging to understand extracellular vesicle biology in vivo. Nature Methods. 2021


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