產品效果
PKH26激發(fā)光與發(fā)射光圖譜
PKH67激發(fā)光與發(fā)射光圖譜
PKH26染色后外泌體與細胞共培
PKH67染色后外泌體與細胞共培
產品組成
方法一:外泌體直接染色
1. 適量(10ug,BCA法測量)外泌體溶于500ul Diluent C中(可以用DPBS代替);
2. 適量的PKH26(10ug外泌體推薦用量不超過1ul)染料溶于等體積的Diluent C中(可以用DPBS代替),溫和吹打混勻;
3. 將步驟2中的溶液加入1中并迅速吹打混勻。
4. 避光,室溫靜置孵育5-10 min;
5. 加入等體積(2ml)的血清(exosome free),或者1%BSA終止染色反應;
6. 使用超濾/超離方式洗凈未與外泌體結合的PKH26染料。
方法二:通過細胞染色間接對外泌體染色
1. 2×107細胞500g,5min離心,盡量棄去上清。
2. 加入1ml Diluent C,溫和吹打混勻。
3. 將4ul PKH26儲存液加入1ml Diluent C中(可以用DPBS代替),溫和吹打混勻;
4. 將步驟2中制備的細胞懸液加入步驟3中的制備的PKH26工作液,快速吹打混勻后室溫靜置孵育5min;
5. 加入等體積(2ml)的血清(exosome free),或者1%BSA終止染色反應;
6. 使用超濾/超離方式洗凈未與外泌體結合的PKH26染料。
注意:染色后的外泌體請立即使用或儲存于-80℃
參考文獻
Verweij et al. The power of imaging to understand extracellular vesicle biology in vivo. Nature Methods. 2021
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